器官移植中供体器官的严重缺乏一直是困扰需要器官移植患者的关键问题．中山大学眼科中心主任葛坚领导的研究小组培育成了猴鼠嵌合体﹣﹣“猴鼠”，期待成果用于人体角膜等器官的移植．根据科研过程示意图回答有关问题：

（1）图中①培养过程中为了防止杂菌污染要加入一定量的 ；而由于人们对细胞所需的营养物质还没有完全弄清楚，所以还要加入  ．

（2）囊胚已出现细胞分化，应将猴子的皮肤干细胞注射到小鼠囊胚的 部位，才能伴随其发育成某种组织．

（3）试验中③和④要同时注射激素的目的是 ． 而将囊胚移入代孕鼠体内属于 技术，此技术对代孕受体的要求是 

（4）在畜牧生产中采用这种技术的优势主要是 ， 若想进一步提高胚胎的利用率，可采用 技术．

（1）图为某科研小组采用“基因靶向”技术先将小鼠的棕褐毛色基因导入黑色纯种小鼠的ES细胞中，再将改造后的ES细胞移植回囊胚继续发育成小鼠的过程．在目的基因获取和基因表达载体构建过程中使用的工具酶有 ．

（2）图中完成第Ⅱ步操作得到由两个DNA切段连接成的产物有 种重组DNA分子；第Ⅲ步操作后，还需经过 的过程，才能将该ES细胞注射到囊胚中．

（3）ES细胞在功能上具有 的特点；目前研究人员正尝试通过科技手段利用ES细胞经过特殊诱导，为因故失去手的患者提供新的“手”，该过程揭示了细胞 的机理．

（4）已知细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基嘌呤阻断，一般情况下，细胞中有D或S途径即能分裂增殖．人淋巴细胞中虽然有这两种DNA合成途径，但一般不分裂增殖．鼠ES细胞中只有D途径，但能不断分裂增殖．将这两种细胞在试管中混合，加 促融，获得杂种细胞．若要从培养液中分离出杂种细胞，写出实验方法（不考虑机械方法），并说明理由．

方法： ．

理由： ．

请根据给出的材料回答下列相关问题．

Ⅰ．据美联社2008年1月17日《干细胞》杂志报道，美国加州的科学家使用了进行试管受精的年轻女性捐献的卵子，以及2名志愿者的皮肤成纤维细胞，成功克隆出了5个人体胚胎，进而可以开发出有研究价值的干细胞．请回答：

（1）上述过程中主要应用到的动物细胞工程技术有 ．

（2）在使用合成培养基进行胚胎干细胞培养时，通常需要加入 等天然成分．在细胞培养时，要保证被培养的细胞处于一定的气体环境，所需要的气体主要有 ．

（3）科学家用分割针进行胚胎分割移植，需要均等分割，保证均等的目的是 ．

Ⅱ．如图所示为人类“治疗性克隆”的大概过程，请据图作答．

（4）在体外培养条件下，为保持胚胎干细胞的未分化状态，通常在培养皿中铺上一层 细胞或培养在添加了抑制因子的培养液中．

（5）科学家为何要将患者的体细胞的核植入去核的卵细胞，而不直接用体细胞进行细胞培养？ 

（6）若将上述技术用于白血病人的骨髓移植，且图中患者是A型血（I^Ai），提供卵细胞的女性是AB型血（I^AI^B）的，则骨髓移植成功后患者的血型是 　型．

（1）小鼠皮肤细胞中与胰岛素合成相关的基因处于 状态，从iPSC到胰岛素分泌细胞的过程叫做 ，所诱导形成的胰岛素分泌细胞是胰岛 细胞．

（2）胰岛素与胰高血糖素的作用相互 ，共同维持机体血糖含量的相对稳定．

（3）进行细胞移植后的糖尿病小鼠的血糖变化是： ．

（4）在血糖调节的过程中，反馈调节具体表现在： ．

（1）成年人体内存在的组织干细胞可根据其发育潜能分为全能干细胞、多能干细胞和单能干细胞三种类型，其中全能于细胞是 ，在形态上具有 等特点，来源于胚胎培养中的 期 （填胚胎结构），也可从胎儿的 细胞中提取．

（2）乳腺中的多能干细胞能分化形成各种类型的细胞，该变化过程的实质是 ，引起细胞之间功能差异的直接原因是 （填物质）不同，根本原因是 （填物质）不同．多能干细胞的获得，不使用胚胎细胞或卵细胞，也不诱导发育成个体，因此，不会像生殖性克隆一样引发　问题．

（3）乳腺癌是乳腺细胞在的作用下基因发生了突变，可通过形态上的变化来进行判断．进一步研究发现，这些乳腺干细胞的特异标记﹣﹣蛋白C受体是一种细胞膜表面受体，将来针对它而设计的药物 （填“需要”或“不需要”）进入细胞内起效，因而是理想的药物靶点．

（4）目前对于细胞的研究较为广泛，如可将干细胞用于检测有毒物质是否引起了基因突变，此应用在分子水平上需要采用 技术．

（1）科研人员已成功地将一个胚胎干细胞培育出了树突状细胞，该培育的成功体现了 ．

（2）当病原体侵入人体时，树突状细胞会及时“通知”并激活T细胞来诱导机体产生特异性免疫应答，其类型包括 和 ．

（3）树突状细胞还起到体内的免疫监视作用，具有极强的抗原吞噬能力，这种吞噬过程属于物质出入细胞的 方式，形成的吞噬泡与 （细胞器）融合，可将吞噬泡中的抗原降解．

（1）ES细胞是由 或 中分离出来的一类细胞；在形态上，表现为体积小、细胞核大、核仁明显；在功能上，具有发育的 ．另外，在体外培养的条件下，可以增殖而不发生分化，对它可以进行冷冻保存，也可以进行 ．

（2）运用 技术可以形成重组细胞，对重组细胞的培养，其培养液与植物细胞培养的培养基主要不同点是含有 ．

（3）利用重组细胞培养出的干细胞，也可以形成特定器官组织，这是 的结果．

（4）通过ES细胞培育出的人造组织器官，可以解决目前临床上存在的供体器官不足和器官移植后的问题．

瑞典卡罗林斯卡医学院2012年10月8日宣布，将2012年诺贝尔生理学或医学奖授予英国科学家约翰•格登和日本医学教授山中伸弥，以表彰他们在“体细胞重编程技术”领域做出的革命性贡献.2006年山中伸弥等科学家把4个关键基因通过逆转录病毒转入小鼠的成纤维细胞，使其变成多功能干细胞．这意味着未成熟的细胞能够发展成所有类型的细胞．如图为胚胎干细胞及其分化的示意图．请回答：

（1）山中伸弥的实验包括哪几种现代生物技术？ ．

（2）上述实验中的逆转录病毒充当 ． 要想获得大量的目的基因，一般需要采用 技术．基因工程的核心是 ．

（3）胚胎干细胞是从动物胚胎发育至 期的内细胞团或胎儿的 中分离得到的一类细胞．

（4）图中分化程度最低的干细胞是  ． 在体外培养条件下，培养液中加入因子，可诱导该种干细胞向不同类型的组织细胞分化．

（5）在机体内，神经组织干细胞分化成神经细胞是机体细胞中基因 的结果．

（6）某患者不能产生正常的白细胞，通过骨髓移植可以达到治疗的目的．骨髓移植的实质是将上图中的 细胞移植到患者体内．

（7）若要克隆某种哺乳动物，从理论上分析，图示各种成熟体细胞中不能作为供体细胞的是 ， 其原因是 

（1）上述过程中主要应用到的动物细胞工程有 ；若将某经过修饰的基因导人其中的部分胚胎干细胞，常用的方法是 ；

（2）在使用合成培养基进行胚胎干细胞培养时，通常需加入 等天然成分，除了需要保证被培养的细胞处于无菌、无毒及充足的氧气外，还要提供适宜的 ．如果将此细胞用于检测有毒物质是否引起了细胞基因突变，可用 技术；如果想检测不同浓度的有毒物质引起细胞染色体变异的程度，则可以检测出变异细胞 来作为指标．

（1）良种公牛获得的精子在体外受精前需要放入 溶液中进行获能处理，从良种母牛卵巢中获得的卵母细胞需培养至 方可受精．

（2）在试管牛E和克隆牛G的培育过程中均用到的现代生物工程技术有 和 ．

（3）早期胚胎培养到 时期再移植入母牛子宫内，受体母牛D应处于适合的生理状况，此时可利用激素对受体进行 处理；此外，受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生 反应，这为胚胎在受体内的存活提供了可能．

（4）通过试管动物技术培养发育为早期胚胎后，再经 产生多个基因型相同的后代．对胚胎进行分割时，要特别注意将 均等分割，否则会影响分割后的胚胎恢复和进一步发育．

（5）简称ES或EK细胞，是由 中分离出来的一类细胞．

体外培养时，可以而不发生 ．在培养基中加入 ，可诱导其分化成各种组织细胞．